Denná medicína

Parietálna mikroflóra čreva zabraňuje priepustnosti patogénnych mikróbov cez sliznicu. Jeho antibakteriálna aktivita vzniká syntézou organických kyselín, v dôsledku čoho kyslosť (pH) prostredia klesá na 4,0-3,8. Takáto nízka kyslosť inhibuje rast a reprodukciu patogénnych a hnilobných mikroorganizmov, ktoré sa v alkalickom prostredí cítia dobre, čo je dôsledkom hnilobného a fermentačného procesu v črevnom trakte.

Preto na normálnej úrovni (kvantitatívna a kvalitatívna) priaznivá črevná mikroflóra interferuje s rastom a reprodukciou patogénnej mikroflóry a chráni telo pred vznikom črevných infekcií. Významná je aj úloha bifidobaktérií v procese trávenia potravy. Sú schopné zvýšiť hydrolýzu (rozpad) proteínov, fermentovať cukry, rozkladať tuky, rozpúšťať vlákninu, stimulovať črevnú motilitu a zabezpečiť normálnu evakuáciu jej obsahu. Biologicky aktívne látky (BAS), ktoré vylučujú bifidobaktérie, sa aktívne podieľajú na metabolických procesoch organizmu, znižujú toxické zaťaženie pečene. Pod ich vplyvom sa normalizuje zloženie krvi (zvyšuje sa obsah hemoglobínu a znižuje sa rýchlosť sedimentácie erytrocytov (ESR)).

V posledných rokoch bola objavená ďalšia dôležitá úloha bifidobaktérií - schopnosť ovplyvňovať metabolizmus lipidov (tukov) v tele znížením sérového cholesterolu a normalizáciou hladiny lipoproteínov a fosfolipidov cirkulujúcich v krvi. Pravdepodobne to nie je posledný objav úžasných vlastností a schopností našich mikroskopických symbiotických priateľov.

Vyššie uvedené príklady účasti symbiotických mikroorganizmov na vitálnej aktivite hostiteľského organizmu teda ukazujú obrovský význam pre takúto symbiózu pre ľudí. Je bezpečné povedať, že človek je zdravý, keď je zdravá mikroflóra obývajúca jeho črevný trakt zdravá a plná.

Zdravá symbiotická mikroflóra je vysoko citlivý indikátorový systém, ktorý okamžite reaguje s kvalitatívnymi a kvantitatívnymi posunmi v zložení na zmeny podmienok prostredia vo svojich biotopoch. Keď sa zhoršujú podmienky prostredia, množstvo mikroflóry sa mení až do úplného vymiznutia (eliminácie), čo vedie k rýchlemu rozvoju patogénnej flóry, kvasiniek podobných húb a húb Candida, čo indikuje výskyt akútnej dysbakteriózy.

Podľa Ruskej akadémie lekárskych vied takmer 90% ruskej populácie trpí do určitej miery dysbakteriózou. Existuje niekoľko skupín príčin vedúcich k dysbakterióze:

rôzne somatické infekčné ochorenia; užívanie antibiotík; chemoterapiu, hormonálnu a radiačnú terapiu; stresujúce situácie; veľká fyzická námaha a preťaženie; nepriaznivá ekologická situácia; sociálne faktory (podvýživa, nedostatok vitamínov, nevyvážená výživa), prejedanie sa (jedenie veľkého množstva jedla naraz, zapríčinenie roztiahnutia žalúdočných stien a narušenie fermentácie zmesi potravín); alkoholizmus; sezónne faktory (jeseň a jar); age.

Pre moderné ruské podmienky je charakteristický úplný súbor vyššie uvedených dôvodov, ktorý spôsobuje akútnu a chronickú dysbakteriózu. Ak ste športovec, alebo len fyzicky aktívna osoba, potom môžete ľahko nájsť v tomto zozname niekoľko dôvodov, prečo môžete predpokladať, že máte dysbiózu.

Nerovnováha "mikroflóra - makroorganizmus - prostredie" vedie k zmenám v spoločenstve živých organizmov žijúcich v črevách, ktoré sa vyskytujú dlho pred klinickými prejavmi a slúžia ako predchodca odchýlok v klinickom a fyziologickom stave organizmu.

Čiastočná alebo úplná eliminácia bifidobaktérií vedie k inhibícii imunologických síl organizmu, pretože trávenie, absorpcia a všetky typy metabolizmu sú narušené: absorpcia železa, vápnika je znížená a funkcia črevnej mikroflóry syntetizujúca vitamíny trpí. Vzniká takzvaná "biotická disinhibícia" a dochádza k "invázii" patogénnej mikroflóry. Na pozadí poklesu imunologickej ochrany vznikajú podmienky na realizáciu patogénneho účinku „spiacej“ infekcie. Mikroorganizmy, ktoré sa usadili v črevách s dysbakteriózou (atypické formy) sa líšia od normálnej mikroflóry v metabolizme. Nie sú schopné vykonávať mnohé fyziologické funkcie normálnej mikroflóry, a najmä sa stráca schopnosť inaktivovať toxické produkty črevného obsahu. Intestinálna absorpčná kapacita je zhoršená, čo vedie k závažným zmenám v činnosti celého organizmu. Existujú klinické javy ako anémia, dystrofia, polyhypavitaminóza, ktoré môžu ovplyvniť vývoj mnohých chorôb alebo zhoršiť priebeh ochorenia. U mladších detí teda črevná dysbióza vedie k zníženiu absorpcie vápnika, preto sa u nich rachitída a nedostatočný nárast hmotnosti vyskytujú 10-krát častejšie ako u zdravých detí a slúžia ako podklad pre rozvoj pneumónie.

Prečítajte si viac >>>

Vypracovanie podnikateľského plánu projektu výroby a predaja zariadenia na diagnostiku a testovanie liekov BIOTEST
Navrhovaný podnikateľský plán je určený na zdôvodnenie výroby a vývoja nového zdravotníckeho zariadenia Biotest určeného na diagnostiku a liečbu mnohých chorôb podľa metódy vývoja.

Úloha centrálneho nervového systému pri regulácii vitálnej aktivity
Nervový systém je rozdelený na centrálny nervový systém - mozog a miechu - a periférny nervový systém - nervové uzliny a nervové uzliny siahajúce od mozgu a miechy. U

Ošetrovateľský proces na pohotovostnom gynekologickom oddelení
V poslednej dobe sa počet gynekologických ochorení neustále zvyšuje. Zanedbanie pravidiel hygieny, častých hypotermií, potratov a iných endogénnych a exogénnych príčin vedie k tomu, že 90%.

Včasné pooperačné komplikácie pri cievnej chirurgii
Napriek výraznému pokroku v chirurgickej liečbe pacientov s arteriálnou patológiou, ktoré sa v súčasnosti dosahujú, sú stále pomerne časté rôzne pooperačné komplikácie. Všetky komplikácie bl.

Parietálna mikroflóra je

Rôzne neinfekčné zápalové ochorenia čriev a "funkčné" poruchy (syndróm dráždivého čreva) sú často sprevádzané zmenami mikroekkologickej homeostázy. V súčasnom štádiu vývoja domácej gastroenterológie sa problém črevnej dysbiocenózy hodnotí z nových perspektív (Sheptulin AA, 1999).

Mnohé diskusné články sú venované tejto problematike o úlohe črevnej mikroflóry pri zabezpečovaní normálneho fungovania organizmu, ako aj mikrobiologických aspektoch diagnostiky porúch biocenózy (B. Shenderov, 1998, V. Bondarenko, 1998, V. G. Rumyantsev, G.999, Korneva T. K., 1999, Z. Zimmerman, 2000)

Črevná mikroflóra je funkčne rozdelená do dvoch hlavných skupín: parietálna a luminálna. Osvetlená alebo prechodná mikroflóra je súčasťou fekálnej mikroflóry. Jej hlavnými predstaviteľmi sú aeróbne a voliteľné aeróbne mikroorganizmy, najmä členovia čeľade Enterobacteriaceae.

Zloženie luminálnej mikroflóry nie je konštantné a mení sa v závislosti od povahy potravy, kvality potravín, funkčného stavu čreva, frekvencie stolice. V tomto ohľade je bakteriologické vyšetrenie fekálnej mikroflóry štandardnou metódou (Metodické odporúčania Ministerstva zdravotníctva ZSSR č. 10-11 / 31 zo dňa 04.14.1986 g) štúdiou tej časti bakteriálneho spektra, ktorá už neexistuje alebo nebude v blízkej budúcnosti.

Táto posledná okolnosť má najväčší význam pri interpretácii výsledkov bakteriologickej inokulácie výkalov v tzv. "Funkčných" ochoreniach čreva. Najmä pri syndróme dráždivého čreva s hnačkou je konštantné "lúhovanie" luminálnej mikroflóry a je sotva možné spoľahlivo posúdiť určitú jeho konštantnosť a následne aj patologické účinky na sliznicu.

Parietálna mikroflóra je 99% reprezentovaná anaeróbnymi a voliteľne anaeróbnymi baktériami tvoriacimi spóry (bifidobaktérie a laktobacily, bakteroidy, streptokoky kyseliny mliečnej atď.) Parietálna flóra je „fixovaná“. Zástupcovia normálnej mikroflóry sú naviazaní na povrchové receptory epitelových buniek. Je stabilnejší, je stabilný systém, ktorý je pomerne ťažké zničiť.

Vzhľadom na skutočnosť, že presídlenie saprofytických populácií v hrubom čreve je rozdielne aj za normálnych podmienok (Michelsaar ME, 1990) a v obsahu výkalov dominuje prechodná mikroflóra, ako aj ťažkosti pri bakteriologickom hodnotení spektra parietálnych črevných mikroflórov, je celkom nesprávne posudzovať zmeny vo fekáliách. mikrobiálna koenóza len podľa výsledkov bakteriologického vyšetrenia výkalov.

V tomto ohľade je dôležité presne stanoviť parietálnu mikroflóru hrubého čreva. To sa môže uskutočniť bakteriologicky, siatím koloniálnych bioptánov na živné médium a histobakterioskopickým vyšetrením svetelnou mikroskopiou prípravkov zafarbených špeciálnou technikou.

Histobakterioskopická metóda bola široko používaná v prácach A.V. Zinserling a jeho škola v štúdiu infekčných chorôb. Detekcia mikroorganizmov sa môže uskutočňovať ako v náteroch, tak v histologických rezoch. Ich počet, ako aj štruktúra tkanivových buniek sa môžu detegovať použitím rôznych metód farbenia (Zinserling AV, 1993).

Problémy vyplývajúce z tejto metódy výskumu súvisia s čisto technickými otázkami - umývaním povrchovej vrstvy hlienu mikroorganizmami, ktoré sa v nej nachádzajú pri spracovaní bioptického materiálu, v dôsledku čoho sa hodnotenie mikroflóry stáva nemožným alebo nepoužiteľným.

Metódy fixácie, ktoré umožňujú stabilizáciu steny steny biopsického hlienu, boli vyvinuté na diagnostiku Helicobacter pylori (Morozov IA, 1997, 1999). Navrhuje sa spôsob pokrytia povrchu biopsie vrstvou agarového gélu, aby sa zabránilo premytiu parietálneho hlienu pri vysielaní materiálu na posúdenie stupňa kontaminácie a vzťahu baktérií k povrchu žalúdočnej sliznice.

Táto technika sa používa na zachovanie supraepiteliálneho hlienu v kolobioptátoch. Predbežné ponorenie kusu sliznice do 1% agarového gélu zahriateho v mikrovlnnej rúre, pripravenej na sterilnom fosfátovom pufri pH 7,2-7,4, vám umožňuje fixovať hlien s mikroorganizmami v ňom a uložiť ho s ďalším zapojením a farbením biopsie. Vrstva agarového gélu do určitej miery vytvára anaeróbne podmienky pre mikroorganizmy počas dodávania materiálu do bakteriologického laboratória.

Na bakteriologickú inokuláciu sa použil homogenizovaný biopted fragment sliznice hrubého čreva v 0,1 ml izotonického roztoku chloridu sodného. V prvej fáze štúdie bolo zamýšľané vyhodnotiť len zloženie aeróbnej mikrobiálnej populácie. Účtovníctvo sa uskutočňovalo v jednotkách tvoriacich kolónie (CFU) na pevnom živnom médiu v 1 ml substrátu, po ktorom nasledovala biochemická a sérologická identifikácia členov čeľade Enterobacteriaceae a ďalších podmienečne patogénnych baktérií.

Vedením histobakterioskopickej štúdie sa počet mikroorganizmov v parietálnom hliene koloniopsie hodnotil semikvantitatívnou metódou analogicky so stanovením stupňa kontaminácie H. pylori v gastrobiopsii. slabý stupeň šírenia - až 20 mikrobiálnych orgánov, v priemere 20-50 mikrobiálnych orgánov, silný - viac ako 50 mikrobiálnych orgánov v zornom poli so zvýšením x900 (ponorenie oleja).

Colonobioptata pacientov s diagnózou syndrómu dráždivého čreva, u ktorých sa uskutočnila kolonoskopia a biopsia na vylúčenie nádorového procesu, zápalového ochorenia čriev atď., Sa vybrali ako model na štúdium parietálnej mikroflóry hrubého čreva, ktorí nemajú výrazné štrukturálne zmeny v kolonoskopii a biopsii. tieto objekty môžu byť brané ako podmienená norma (nezmenená sliznica).

Skúmalo sa 70 pacientov vo veku od 15 do 50 rokov. Študovalo sa 210 kolobioptátov získaných fibrokolonoskopiou zo slepého, priečneho hrubého čreva a sigmoidného hrubého čreva. V 30 vzorkách biopsie sa zdalo, že vrstva hlienu v blízkosti steny je desquami. Histobakterioskopický obraz nebol overený. V 180 prípravkoch sa zachovala parietálna vrstva hlienu, čo im umožnilo podrobiť sa histobakterioskopickému vyšetreniu.

V bioptických vzorkách sliznice slepého čreva (51 vzoriek) v štúdii histobakterioskopickej metódy sa zistil vysoký stupeň kontaminácie v 28 prípadoch. Flóru reprezentovali gram-pozitívne tenké tyčinky, usporiadané v krátkych reťazcoch alebo paralelne (pravdepodobne laktobacily) a pleomorfný vzhľad (pravdepodobne bifidobaktérie).

Gramnegatívne pleomorfné tyčinky (pravdepodobne bakteroidy) boli pozorované v takmer rovnakom pomere s grampozitívnymi zástupcami mikroorganizmov. Gram-pozitívne malé kokky umiestnené jednotlivo boli detegované v malom množstve. Spolu s nimi existoval nízky stupeň diseminácie s malými gramnegatívnymi priamymi tyčinkami, umiestnenými oddelene alebo v pároch (pravdepodobne mikroorganizmy čeľade enterobacteriaceae).

V 20 vzorkách boli vyššie opísané gram-pozitívne a gram-negatívne tyčinky, morfologicky podobné laktobaktériám a bifidobaktériám a bakteroidom, určené miernym spôsobom a gram-negatívne tyčinky, morfologicky podobné enterobaktériám, boli tiež zaznamenané v malom množstve. Iba v 4 prípadoch gram-negatívne bacily zo skupiny enterobaktérií spôsobili vysoký stupeň infekcie so slabým stupňom kolonizácie sliznice zástupcami normálnej mikroflóry.

Bakteriologická kultúra cekálnej biopsie ukázala rast plných kmeňov E. coli. V 9 bioptických vzorkách sa E. coli vysiali so zníženou enzymatickou aktivitou, v 4 E. coli s hemolytickou schopnosťou, v jednom prípade sa identifikovala detoxikačná kultúra Klebsiella.

Histobakterioskopická štúdia bioptických vzoriek mukóznej membrány priečneho hrubého čreva nám umožnila stanoviť vysoký stupeň diseminácie grampozitívnymi a gramnegatívnymi tyčinkami (zástupcovia normálnej mikroflóry) v 16 prípadoch. Zástupcovia rodiny enterobaktérií zároveň spôsobili slabý stupeň kolonizácie.

Vo väčšine prípadov (42 colonobioptata) boli v miernych množstvách pozorované baktérie morfologicky podobné mikroorganizmom normálnej mikroflóry a zástupcovia enterobaktérií a grampozitívnych malých kokrov boli nájdení v rovnakom pomere s malými reťazcami (enterokoky).

Vysoký stupeň diseminácie gram-negatívnymi malými priamymi tyčinkami s malým počtom gram-pozitívnych kokov, umiestnených ako v reťazcoch (enterokoky), tak v zhlukoch (stafylokokoch), bol pozorovaný u 6 kolonobioptátov. Saprofyty v týchto bioptických vzorkách boli prítomné len v malých množstvách.

Bakteriologicky boli zasiate najmä zástupcovia normálnej Escherichia coli. Spolu s nimi v 10 prípadoch identifikovali E. coli so zníženými enzymatickými vlastnosťami, ako aj hemolytické kmene. V 7 prípadoch sa vysiali zástupcovia podmienečne patogénnej mikroflóry (Klebsiella, citrobacter, Staphylococcus aureus).

V stene vzoriek hlienu bioptických sigmoidní pomer mikroorganizmov bolo nasledovné: zo 65 biopsiou k vysokému stupňu znečistenia normálne mikroflóry s nízkym stupňom kolonizácia mikroorganizmami z čeľade Enterobacteriaceae bola pozorovaná v 15 prípadoch, mierny stupeň kontaminácie grampozitívnych tyče s malým množstvom gram-negatívnych baktérií a grampozitívne koky 32 biopsiou V 18 vzorkách prevládali členovia čeľade enterobacteriaceae nad anaeróbnymi mikroorganizmami.

Ich počet sa odhadoval ako vysoký a nízky stupeň šírenia. Spolu s tým bolo v 13 bioptických vzorkách veľký počet gram-pozitívnych stafylokokov a v 2 prípadoch boli pozorované plesňové kvasinkové bunky. V bakteriologických kultúrach boli v rovnakých pomeroch prítomné v E. coli so zníženou enzymatickou aktivitou, hemolytickými kmeňmi a zástupcami normálnej Escherichia coli. Podmienene patogénna mikroflóra bola nasadená v 13 prípadoch.

Pri paralelnom bakteriologickom vyšetrení fekálnej mikroflóry štandardnou metódou u 43 ľudí sa stav črevnej mikrobiocenózy považoval za dysbakteriózu 2-4 stupne. Počas histobakterioskopického vyšetrenia však iba 18 pacientov preukázalo porušenie zloženia parietálnej mikroflóry, ktorá spočívala v znížení počtu zástupcov normálnej mikroflóry a kolonizácii parietálnej vrstvy hlienu hlavne podmienečne patogénnymi baktériami.

Bakteriologické vyšetrenie kolobioptátu nie je bez rovnakých negatívnych aspektov ako štúdia výkalov, hoci v menšom rozsahu. Medzi hlavné metodologické ťažkosti patrí nedostatok selektívnych metód izolácie a anaeróbnej kultivácie sporogénnych anaeróbnych baktérií. Napríklad v hrubom čreve je počet nekultivovaných anaeróbnych baktérií 10 až 10 stupňov - 10 až 11 stupňov mt na 1 g obsahu (Shenderov BA, 1998).

Druhým negatívnym bodom je nedostatok vypracovaných odporúčaní pre kvantitatívne hodnotenie pestovaných mikroorganizmov, normy sa nevypočítavajú. Napriek týmto ťažkostiam sa však zdá, že bakteriologické očkovanie kolonobioptátu vrstvou natívneho hlienu, ktorý je kolonizovaný parietálnou saprofytickou mikroflórou, predstavuje reprezentatívnejšiu štúdiu pri hodnotení stavu mikrobiocenózy hrubého čreva ako očkovania výkalov s hodnotením prechodnej mikroflóry.

Črevná mikroflóra sa vyvinula v procese ľudskej evolúcie, je výsledkom rôznych adaptácií, adaptácie mikroorganizmu na biotop v makroorganizme (VN Krasnogolovets, 1989).

Hlavným energetickým procesom pre anaeróbnu skupinu mikroorganizmov flóry blízkych stien je evolučne najstarší mechanizmus - fermentácia, ku ktorej dochádza bez kyslíka. Organická hmota je donorom a akceptorom elektrónov. Kyslík pre tieto baktérie je buď toxický alebo ľahostajný. Štruktúra črevnej sliznice s jej klkymi, kryptami, vrstvou hlienu vytvorenými pohárkovými bunkami je ideálnym miestom na vytvorenie anaerobióznych stavov.

Normálna mikroflóra kolonizujúca črevnú sliznicu je evolučne staršia a zaujíma svoje miesto. Jednou z hlavných funkcií parietálnej mikroflóry je poskytnúť rezistenciu voči kolonizácii v dôsledku expresie rôznych antagonisticky aktívnych látok, látok podobných antibiotikám, organických kyselín, peroxidu vodíka, lyzozýmu, kolicínov, blokátorov receptorov atď., Mikroorganizmami, ktoré zabraňujú adhézii patogénnych a podmienene patogénnych mikroorganizmov na enterocyty.

Tiež známy je ďalšiu dôležitú funkciu saprofytických mikroflóry - imunomodulačná spojené s grampozitívne baktérie produkujú muramyldipeptid, ktorý má stimulačný účinok na fagocytov, a s vplyvom O-antigén gramnegatívnych baktérií na syntézu imunitných buniek secernujúcich imunoglobulíny, cytokíny a interferónu (A. Bondarenko s et al., 1998).

Intestinálny parietálny hlien, sekrečné imunoglobulíny a saprofytická flóra spolu tvoria predepitelovú ochranu, ktorá zaberá depresie a zvýšenia tvorené enterocytmi. Náhodné patogénne mikroorganizmy, ktoré vstupujú do črevného lúmenu alebo podmienečne patogénne baktérie, ktoré v ňom žijú, produkujú rôzne endo- a exotoxíny.

Cesta k toxínom k ​​ich špecifickým receptorom blokuje biofilm slizničnej bariéry. Za priaznivých podmienok pre masívnu reprodukciu patogénov existuje reálna možnosť, aby prejavili svoje patogénne vlastnosti v dôsledku adhézie na epitelové bunky s následnou kolonizáciou sliznice.

Hlavným zdrojom energie pre aeróbne mikroorganizmy luminálnej flóry je oxidačná fosforylácia. Donorom elektrónov sú organické zlúčeniny biologického pôvodu, ktoré sú v optimálnom množstve v lúmene čreva.

Nepriaznivé environmentálne faktory, poruchy výživy, iracionálne používanie antibiotík, hormonálna terapia a ďalšie negatívne účinky, ktoré oslabujú nešpecifickú a špecifickú rezistenciu makroorganizmu, prispievajú k vzniku chronického zápalového procesu a sprievodnej dysbakterióze v gastrointestinálnom trakte.

Patogénny mikroorganizmus, ktorý má možnosť kontaktu s enterocytom (kolonocytmi) v miestach „prelomu“, spúšťa sekréciu typu 3 (kontaktne závislý) - hlavný molekulárny mechanizmus prežitia a reprodukcie v hostiteľskom organizme, ktorý je spoločný pre rôzne baktérie (Musser J M, 1996). Tento mechanizmus je zodpovedný za transport efektorových molekúl z cytoplazmy na povrch baktérií, kde po kontakte spôsobujú modifikáciu bunkových proteínov. Takéto efektorové molekuly sa našli v Yersinia, S flexneri, E. coli (Ryapis LA, Lipnitsky AV, 1998).

Keď je poškodená slizová vrstva obsahujúca IgA, dochádza k degranulácii pohárikových buniek pri deštrukcii saprofytickej flóry (Droy M.T. 1985). To nahrádza biofilm z normálnej mikroflóry biofilmom podmienene patogénnych alebo patogénnych mikroorganizmov. Za určitých podmienok sa podmienečne patogénne baktérie môžu stať konkurencieschopnejšími pre adhézne miesta ako bifidobaktérie a laktobacily a pretože ich spojenia s bunkami sú extrémne silné, je možné vytvoriť zdroj endogénnej infekcie.

Použitie histobakterioskopickej metódy výskumu spolu s morfologickým hodnotením biopsie kolvióna umožňuje vyhodnotiť zloženie stenovej mikroflóry, ktorá odráža objektívny obraz o stave mikrobiocenózy, pretože v tejto oblasti prichádza mikroorganizmus do kontaktu s kolónií. Táto metóda, spolu s bakteriologickým naočkovaním bioptického materiálu, môže byť použitá na indikatívnu charakteristiku kvalitatívneho zloženia parietálnej mikroflóry hrubého čreva pri komplexnom klinickom a laboratórnom vyšetrení pacientov s črevnou dysfunkciou.

literatúra

1. Bondarenko A.V., Bondarenko V.M., Bondarenko V.M. Spôsoby zlepšenia etiopatogenetickej terapie dysbakteriózy. // Journal mikrobiol. -1998. - № 5. - s.

2. Dysbakteriózy gastrointestinálneho traktu / V.M. Bondarenko, B.V. Boev, E.A. Lykova a kol., // Ros. gastroenterol., hepatol, coloproct. -1998. - №1.-C.61 - 63.

3. Koreneva TK Intestinálna dysbakterióza u proktologických pacientov s mikrobiologickými aspektmi. // Ros. Journal gastroenterol, hepatol col. - 1999. - № 3 -С. 55- 60.

4. Krasnogalovets V.D. Intestinálna dysbióza. M.: Medicine, 1989. - 208 str.

5. Muselsaar M.E. Tvorba a uchovávanie rezistentnej mikroflóry gastrointestinálneho traktu / Postupy VNIIA. - M., 1990. -Fire 19 - C26

6. Morozov I.A. Morfologické aspekty HP infekcie v žalúdku // Piate zasadnutie Ruskej skupiny pre štúdium Helicobacter pylori. Materiály na zasadnutia. - Omsk, 1997. -C. 62-66 7 Morozov I.A. Problémy morfologickej diagnózy Helicobacter pylon v žalúdku. // Ros. Zh. gastroenterol hepatol; Koloprokt - 1999 - №2. -C. 46 - 48.

8. Použitie bakteriálnych biologických prípravkov v praxi pri liečbe pacientov s črevnými infekciami. Diagnostika a liečba črevnej dysbiózy: Metóda, odporúčania / Ministerstvo zdravotníctva ZSSR. - M, 1986 - 23 s

9. Rumyantsev V.G. Intestinálna dysbakterióza, klinický význam a princípy liečby. gastroenterol., hepatol, coloproct - 1999-O3 -C. 61 - 63.

10. Ryapis LA, Lipnitsky A. Century Mikrobiologické a populačno-genetické aspekty patogenity baktérií // Zhurn mikrobiol -1998. - № 6. -1 109-113

11 Zinserling A.V. Moderné infekcie. Problémy patologickej anatómie a patogenézy. Sprievodca. - SPb. Sothis - 1993 - 363s

12. Zimmerman Ya.S. "Západoeurópania" a ich miesto v modernej ruskej lekárskej terminológii, iné kontroverzné terminologické problémy // Klin. medicíny. - 2000 - №1 - С 59 - 62

13 Shenderov B.A. Normálna mikroflóra a jej úloha pri udržiavaní ľudského zdravia. // Ros žurnál. gastroenterol, hepatol, coloproct - 1998 - № 1. -C. 61- 65.

14. Sheptulín A.A. Syndróm prerastania baktérií a "intestinálna dysbióza": ich miesto v modernej gastroenterológii. // Ros. Journal gastroenterol., Hepatol, coloproct. - 1999. - № 3 - С 51 - 55

Moderné myšlienky o ľudskej mikroflóre: čo je dysbakterióza?

Autor: Doktor, Vedecký riaditeľ Vidal Rus, Zhuchkova T. V., [email protected]

V roku 1681, A. V. Levenguk urobil medzník vedeckého objavu. V stolici objavil mikroorganizmy a predložil hypotézu o koexistencii rôznych typov mikroorganizmov v gastrointestinálnom trakte (GIT). V budúcnosti sa zmenili názory na ľudskú mikroflóru. Z negatívneho názoru I. I. Mechnikov, ktorý predstavoval príčinu infekčných chorôb kumulatívnym účinkom toxínov baktérií v tráviacom trakte na telo, k prudkému pozitívnemu názoru na prínosy, ktoré ľudia dostávajú z koexistencie organizmu a baktérií.

V súčasnosti sa črevná mikroflóra považuje za nezávislý dodatočný viacbunkový orgán, ktorý sa podieľa na homeostáze - dynamická stálosť vnútorného prostredia tela, zabezpečujúca vyváženú prácu všetkých orgánov a systémov. Celkový počet mikroorganizmov žijúcich v rôznych častiach ľudského tela je 1015 (100 biliónov) o 2 rády viac ako ľudské bunky. Hmotnosť normálnej mikroflóry je 5-6% telesnej hmotnosti. 60% z nich je v gastrointestinálnom trakte, 15% v dýchacom trakte, 11% v urogenitálnom systéme, 14% na ľudskej koži. V hrubom čreve žije viac ako 1000 druhov mikróbov. Okrem toho, celkový počet génov črevnej mikrobiózy (súbor baktérií, vírusov, húb a prvokov, ktoré obývajú ľudskú dutinu a integument)

10, čo je o 2 rády väčšie ako ľudské gény.

Normálna črevná mikrobiota je 1 800 rodov a 15 000 až 36 000 druhov baktérií. Približne 20% živín vstupujúcich do čriev a 10% energie produkovanej telom sa spotrebuje na kŕmenie mikroflóry.

Črevná mikroflóra pozostáva z dvoch vzájomne prepojených populácií: abdominálnej a parietálnej (mukozálnej) mikroflóry. Slizničná mikroflóra sú kolónie baktérií, nimi produkované metabolity, ako aj epitelové bunky, mucín pohárikových buniek, fibroblasty, leukocyty, lymfocyty, imunitné bunky. Svetelná mikroflóra sa nachádza v lúmene gastrointestinálneho traktu, nereaguje so sliznicou, je premenlivejšia, závisí od príjmu vlákniny. Normálna mikroflóra hrubého čreva sa skladá z povinnej, fakultatívnej a prechodnej flóry. Povinná flóra (konštantná) obsahuje bifidobaktérie, laktobacily, enterokoky, E. coli, propionibaktérie, peptostreptokokki. Voliteľné (non-permanent) - Clostridia, staphylococcus, Proteus, huby podobné kvasinkám. Tranzitor (náhodný) - pyocyanická tyčinka, huby Candida, patogénne enterobaktérie.

Mikroflóra gastrointestinálneho traktu je rôzna.

Perorálna mikroflóra - streptokoky, laktobacily, neisséria, veyonella, fuzobakterii, bakteroidy, bifidobaktérie, stafylokoky, huby, prvoky, atď. Mikroflóra tenkého čreva - streptokoky, laktobacily, bifidobaktérie. Mikroflóra hrubého čreva obsahuje anaeróbne baktérie: bifidobaktérie, bakteroidy, propionibaktérie, peptostreptokokki, veyonella, eubacteria, fuzobakterii, katenobakterii; mikroaerofilus: laktobacily a aeróby: Escherichia, mliečny streptokok, fekálne streptokoky, stafylokoky.

Normálne, v bakteriocenóze hrubého čreva detí, 90-95% z celkového počtu mikroorganizmov sú bifidobaktérie a u dospelých nie viac ako 10%.

Funkcie črevnej mikroflóry sú: ochranné, tráviace, detoxikačné, antikarcinogénne, imunogénne, genetické, funkcie regulácie metabolizmu cholesterolu a syntézy vitamínov.

Čo je dysbakterióza a kedy sa vyskytuje?

Dysbakterióza (dysbióza) je klinický a mikrobiologický syndróm charakterizovaný pretrvávajúcimi a výraznými zmenami v kvalitatívnom a / alebo kvantitatívnom zložení črevnej mikroflóry, ktorá po odstránení nepriaznivého faktora nezmizne, sprevádzaná expanziou jeho biotopu (kolonizácia tenkého čreva) a narušením črevných funkcií. Intestinálna dysbióza je vždy sekundárna, zvyčajne sa vyskytuje na pozadí nepriaznivých vonkajších faktorov a patologických stavov, a preto nemôže byť hlavnou diagnózou.

Príčiny črevnej dysbiózy sú rôzne a rôznorodé. Patrí medzi ne zlá výživa a zlá antibiotická liečba, chronické gastrointestinálne ochorenia, akútne infekčné ochorenia gastrointestinálneho traktu, hnisavé infekčné ochorenia, stavy imunodeficiencie, stres.

Spôsoby podpory a korekcie črevnej mikroflóry: eliminácia príčin dysbakteriózy, prebiotík v potrave, probiotík v zložení produktov, probiotík v zložení liekov, pre dojčatá - zachovanie dojčenia.

Probiotiká - lieky (lieky), pozostávajúce zo živých nepatogénnych mikroorganizmov. Existujú rôzne typy probiotík:

  • monokomponent (bifidumbacterin, lactobacterin);
  • polykomponenty alebo symbiotiká obsahujúce niekoľko kmeňov alebo typov baktérií (Linex);
  • kombinované - synbiotiká obsahujúce baktérie a zložky, ktoré prispievajú k ich rastu alebo reprodukcii (acipol, kipatsid, normospectrum, bifidum-multi);
  • viaczložkové kombinované - symbiotické + synbiotické (bifiform, bion);
  • konkurenčné pôsobenie, vytesnenie oportúnnych a patogénnych mikróbov (enterol, baktisubtil, biosporín, baktistatín).

Prebiotiká - lieky, vláknina alebo potravinové doplnky, ktoré neobsahujú živé mikroorganizmy, stimulujú rast alebo reprodukciu normálnej mikroflóry:

  • oligosacharidy - obilniny, fazuľa, mliečne výrobky;
  • inulín - topinambur, artičok, púpava;
  • laktulóza - duphalac, normáza.

Riešenie problému dysbakteriózy je spojené s potrebou chrániť vlastnú mikroflóru, prispieť k zlepšeniu životného prostredia, výživy, racionálneho používania antibiotík a iných liekov.

Mikroflóra ľudského tela

Mikroflóra ľudského tela je evolučne zavedená kvalitatívne a kvantitatívne relatívne konštantná množina mikroorganizmov, všetkých biocenóz a jednotlivých biotopov tela.

Dieťa sa rodí sterilné, ale stále prechádza cez pôrodný kanál, zachytáva sprievodnú mikroflóru. Tvorba mikroflóry sa uskutočňuje v dôsledku kontaktu novorodenca s environmentálnymi mikroorganizmami a mikroflórou tela matky. Vo veku 1-3 mesiacov sa mikroflóra dieťaťa stáva podobnou mikroflóre dospelej osoby.

Počet mikroorganizmov dospelého je 10 na 14 jedincov.

1. Na 1 cm2 kože môže byť niekoľko sto tisíc baktérií

2. Pri každom dychu sa absorbuje 1500-14000 alebo viac mikrobiálnych buniek.

3. V 1 ml slín - až 100 miliónov baktérií

4. Celková biomasa mikroorganizmov v hrubom čreve je asi 1,5 kg.

Druhy mikroflóry tela

Rezidentná mikroflóra - trvalá, pôvodná, autochtónna

Prechodný - non-permanentný, allochtonický

Odolnosť proti kolonizácii je normálna mikroflóra, ktorá zabraňuje kolonizácii telesných biotopov zvonka patogénnych mikroorganizmov.

Trávenie a detoxikácia exogénnych substrátov a metabolitov

Syntéza vitamínov, aminokyselín, proteínov

Účasť na výmene žlčových kyselín, kyseliny močovej, lipidov, sacharidov, steroidov

Negatívna úloha mikroflóry

Zdrojom endogénnej infekcie môže byť podmienečne patogénny zástupca normálnej mikroflóry. Normálne, tieto mikroorganizmy nespôsobujú problémy, a so oslabeným imunitným systémom, ako je stafilakok - môže spôsobiť hnisavé infekcie. E. coli - v čreve, a ak sa ukáže v močovom mechúre - zápal močového mechúra a ak sa dostane do rany - hnisavá infekcia.

Pod vplyvom mikroflóry sa môže zvýšiť sekrécia histamínu - alergické stavy

Normoflora je skladovanie a zdroj plazmidov rezistentných na antimikrobiálnu rezistenciu.

Hlavné biotopy tela -

Biotopy obývali - v týchto biotopoch žijú baktérie, množia sa a vykonávajú určité funkcie.

Sterilné biotopy - baktérie v týchto biotopoch zvyčajne chýbajú, izolácia baktérií z nich má diagnostickú hodnotu.

Vonkajšie genitálie, močová trubica

Vonkajší zvukový kanál

Sterilné biotopy - krv, cerebrospinálna tekutina, lymfóza, peritoneálna tekutina, pleurálna tekutina, moč v obličkách, uretre a močový mechúr, synoviálna tekutina.

Mikroflóra kože - epidermálne a saprofytické stafylokoky, kvasinkové huby, difteroidy, mikrokoky.

Mikroflóra horných dýchacích ciest - streptokoky, dipteroidy, neissery, stafylokoky.

Ústna dutina - stafylokoky, streptokoky, kvasinkové huby, laktobaktérie, bakteroidy, neissery, spirochety atď.

Pažerák je normálne bez mikroorganizmov.

V žalúdku - prostredie biotopu - mimoriadne nepríjemné - laktobacily, kvasinky, jednotlivé stafylokoky a streptokoky

Črevá - koncentrácia mikroorganizmov, ich druhové zloženie a pomer sa líši v závislosti od črevnej časti.

U zdravých ľudí v dvanástniku počet baktérií nie je väčší ako 10 až 4 až 10 až 5 jednotiek tvoriacich kolónie (ml).

Druhové zloženie - laktobacily, bifidobaktérie, bakteroidy, enetrokoky, kvasinkové huby atď. Príjem potravy môže výrazne zvýšiť počet baktérií, ale v krátkom čase sa vracia na pôvodnú úroveň.

V hornom tenkom čreve je počet mikroorganizmov 10 až 4 až 10 až 5 kolonizačných jednotiek na ml, v ileu až 10 až 8. stupni.

Mechanizmy, ktoré zabraňujú mikrobiálnemu rastu v tenkom čreve.

Antibakteriálny účinok žlče

Sliz obsahujúci inhibítory mikrobiálneho rastu

Ak sú tieto mechanizmy porušené, mikrobiálne očkovanie tenkého čreva sa zvyšuje, t. nadmerný rast baktérií v tenkom čreve.

V hrubom čreve u zdravého človeka je počet mikroorganizmov 10 až 11 až 10 až 12 ko.e ročne, prevažujú anaeróbne typy baktérií - 90 až 95% celkovej kompozície. Sú to bifidobaktérie, bakteroidy, laktobaktérie, veylonella, peptostreptokokki, clostridia.

Asi 5-10% - fakultatívne anaeróby - a aeróby - E. coli, enterobaktérie negatívne na laktózu, enterokoky, stafylokoky, kvasinkové huby.

Druhy črevnej mikroflóry

Pristenochnaya - konštantný v zložení, plní funkciu kolonizačného odporu

Osvietenie - menej konštantné v zložení, vykonáva enzymatické a imunizačné funkcie.

Bifidobaktria sú najvýznamnejšími zástupcami povinných (povinných) baktérií v čreve. Sú to anaeróby, netvoria spóru, sú grampozitívne tyčinky, konce sú rozvetvené a môžu mať sférické opuchy. Väčšina bifidobaktérií sa nachádza v hrubom čreve, pričom je hlavnou parietálnou a luminálnou mikroflórou. Obsah bifidobaktérií u dospelých je 10 v 9 - 10 v 10. c. na mesto

Laktobacily sú ďalším reprezentantom povinnej mikroflóry gastrointestinálneho traktu a laktobacilu. Jedná sa o gram-pozitívne tyčinky, s výrazným polymorfizmom, usporiadaným v reťazcoch alebo jeden po druhom, netvoria spóru. Laktoflora sa nachádza v mlieku ľudí a zvierat. Lactobacillus (laktobacily). Obsah v hrubom čreve je 10 v 6. - 10. v 8. kil. na mesto

Reprezentatívnou povinnou mikroflórou čreva je escherichia (Escherichia collie) - E. coli. Obsah črevných tyčiniek je 10 v 7. - 10. rade v 8. stupni co. na mesto

Eobioz - mikroflóra - normálna flóra. Biologická rovnováha normálnej flóry je ľahko narušená exogénnymi a endogénnymi faktormi prírody.

Dysbakterióza - zmeny v kvalitatívnom a kvantitatívnom zložení mikroflóry, ako aj jej normálneho biotopu.

Intestinálna dysbakterióza je klinický a laboratórny syndróm spojený so zmenami v kvalitatívnom a / alebo kvantitatívnom zložení črevnej mikroflóry, s následnou tvorbou metabolických a imunologických porúch, s možným rozvojom gastrointestinálnych porúch.

Dátum pridania: 2016-01-30; Počet zobrazení: 467; PRACOVNÉ PÍSANIE

Parietálna mikroflóra je

V závislosti od lokalizácie čriev sú mikroorganizmy rozdelené do dvoch skupín, ktoré sa líšia zložením a vlastnosťami. Je to parietálna, mukozálna (mukoidná) mikroflóra, M-mikroflóra. Mikroorganizmy úzko spojené s epitelom črevnej sliznice sa označujú ako parietálna mikroflóra. Bifidobaktérie a laktobaktérie prevažujú v zložení slizničnej mikroflóry.

Druhou skupinou mikroorganizmov je abdominálna, luminálna mikroflóra (P-mikroflóra). Pozostáva z mikroorganizmov, ktoré sú lokalizované v črevnom lúmene (bakteroidy, veylonely, enterobaktérie atď.)

M - mikroflóra (parietálna, mukoidná flóra) sa podieľa na tvorbe črevnej rezistencie kolonizácie, má ochranný účinok, ktorý mechanicky zabraňuje zavádzaniu patogénnych a podmienečne patogénnych baktérií na povrch sliznice. Mukoidná flóra normalizuje metabolické procesy v bunkách sliznice a ďalších vrstvách črevnej steny.

Vo vzťahu k rôznym vonkajším nepriaznivým účinkom je M-flóra zvyčajne stabilnejšia ako P-flóra.

Parietálna mikroflóra je

Článok pojednáva o pojmoch normálnej mikroflóry gastrointestinálneho traktu a jeho funkciách, pojednáva o vlastnostiach dutiny a parietálneho mikrobiotopu a definuje syndróm dráždivého čreva (IBS) a jeho klinické formy. Prezentované sú výsledky štúdie rektálnej mikroflóry rekta metódou polymerázovej reťazovej reakcie u zdravých jedincov a pacientov s IBS. Identifikované štatisticky významné rozdiely. Predložená je komparatívna analýza zloženia mikroflóry rektálnej sliznice a výkalov u pacientov s IBS so zápchou a hnačkou.

Štúdie zloženia mikrobiocenózy gastrointestinálneho traktu (GIT) osoby začali pred viac ako troma storočiami, keď v roku 1681 holandský výskumník Anthony Van Leeuwenhoek prvýkrát informoval o svojich pozorovaniach o baktériách a iných mikroorganizmoch nachádzajúcich sa v ľudských výkaloch a predložil hypotézu o spoločnej existencii. druhy baktérií v tráviacom trakte. V súčasnej dobe dochádza k rozsiahlemu obnoveniu záujmu o črevnú mikroflóru, jej vplyv na ľudské zdravie a chorobu. Vývoj nových molekulárno-genetických technológií, ktoré umožňujú identifikáciu mnohých typov baktérií, ktoré nie sú prístupné kultivácii, slúžil ako spúšťací faktor pre hĺbkovú štúdiu ľudskej mikrobiózy. Objavili sa nové fakty naznačujúce, že črevná biocenóza je spojená s ochoreniami nielen gastrointestinálneho traktu, ale aj kardiovaskulárneho systému, obezity, alergických a autoimunitných ochorení [1].

Štúdium stavu mikrobiocenózy a identifikácia možných odchýlok od normálneho zloženia mikroflóry gastrointestinálneho traktu boli definované koncepciou normálnej mikroflóry. Normálna mikroflóra je kvalitatívny a kvantitatívny pomer v jednotlivých orgánoch a systémoch rôznych populácií mikróbov, ktoré si zachovávajú biochemickú, metabolickú a imunitnú rovnováhu makroorganizmu, ktorý je nevyhnutný na udržanie ľudského zdravia [2]. Odkazovať na normálnu mikroflóru vyšších organizmov, T. Rosebury vo svojej monografii "Mikroorganizmy domorodé pre človeka", publikované v roku 1962 v New Yorku, navrhol názov "microbiota", ktorý sa najčastejšie používa v modernej literatúre. Často sa používa pojem „biotopy“. Biotopom je obvyklé chápať oblasť sliznice, kože alebo orgánu makroorganizmu s rovnakým typom podmienok pre existenciu mikroorganizmov [3]. Z moderného hľadiska sa normálna ľudská mikroflóra považuje za fylogeneticky vytvorený systém viacerých mikrobiocenóz charakterizovaných špecifickým druhovým zložením a zaberajúcim určitý biotop v ľudskom tele [4]. Celková hmotnosť všetkých mikroorganizmov kolonizujúcich ľudské orgány a tkanivá je 3 až 5 kg.

Mikroflóra gastrointestinálneho traktu je najreprezentatívnejšia, jeho hmotnosť u dospelých je viac ako 2,5 kg, počet je 1014 CFU [5]. S prihliadnutím na nové údaje získané pri štúdiu mikroflóry rôznych biotopov gastrointestinálneho traktu pomocou molekulárno-genetických metód, celkový genóm baktérií gastrointestinálneho traktu obsahuje 600 tisíc génov, čo je 24-násobok veľkosti ľudského genómu. Väčšina navrhovaných nových fylotypov mikroorganizmov sú zástupcovia rodov Firmicutes a Bacteroides. Celkový počet druhov sa približuje 1500 a vyžaduje si ďalšie objasnenie [6].

Dutina gastrointestinálneho traktu cez systém sfinkterov komunikuje s vonkajším prostredím sveta okolo nás a zároveň cez črevnú stenu s vnútorným prostredím tela. Vďaka tejto vlastnosti sa v gastrointestinálnom trakte vytvorilo vnútorné prostredie, ktoré možno rozdeliť do dvoch oddelených výklenkov: chyma a sliznica. Z mikroekologického hľadiska sa môže gastrointestinálny biotop rozdeliť na dlhé línie (ústna dutina, žalúdok, črevné časti) a mikrobiotopy (brušné a parietálne).

Mikrobiotop dutiny v gastrointestinálnom trakte je heterogénny, jeho vlastnosti sú určené zložením a kvalitou obsahu jednej alebo druhej vrstvy. Dlhé vlasce majú svoje anatomické a funkčné vlastnosti, takže ich obsah sa líši v zložení látok, konzistencii, pH, rýchlosti pohybu a ďalších vlastnostiach. Tieto vlastnosti určujú kvalitatívne a kvantitatívne zloženie mikrobiálnych dutín, ktoré sú im prispôsobené. Brušná mikroflóra je variabilnejšia ako sliznica a je citlivá na rôzne exogénne vplyvy.

V tomto ohľade má veľký význam pre tvorbu optimálnych kvantitatívnych a kvalitatívnych parametrov abdominálnej mikroflóry dodávka nestráviteľných vláknin s potravou, ktorá pôsobí ako živný substrát a matrica, na ktorej sú zástupcovia povinnej mikroflóry a tvoria kolónie.

Parietálny mikrobiotop je najdôležitejšia štruktúra, ktorá obmedzuje vnútorné prostredie tela z vonkajšieho prostredia. Je reprezentovaný prekrytím slizníc (slizničný gél, mucínový gél), glykokalyx umiestnený nad apikálnou membránou enterocytov (kolonocyty) a povrchom samotnej apikálnej membrány. Parietálna mikroflóra čreva kolonizuje sliznicu vo forme mikrokolonií, čím vytvára zvláštny biologický film pozostávajúci z mikrobiálnych telies a exopolysacharidovej matrice. Exopolysacharidy mikroorganizmov (glykokalyx) chránia mikrobiálne bunky pred rôznymi fyzikálno-chemickými a biologickými účinkami. Črevná sliznica je tiež chránená biologickým filmom. Existuje úzky vzťah medzi kolóniami mikroorganizmov a črevnou stenou, čo umožňuje ich spojenie do komplexu mikrobiálnych tkanív [7]. Parietálny mikrobiotop má najväčší záujem z hľadiska bakteriológie, pretože v ňom vzniká interakcia s baktériami, ktoré sú prospešné alebo škodlivé pre ľudí - čo nazývame symbióza. Brušná a parietálna mikroflóra sú dve vzájomne prepojené populácie, medzi ktorými je konštantná výmena mikroorganizmov, v dôsledku čoho vzniká individuálny variant normálnej črevnej mikroflóry.

Medzi črevnou eubiotickou mikroflórou a hlavnými funkciami gastrointestinálneho traktu existuje úzky vzťah: črevná eubiotická mikroflóra ovplyvňuje funkcie gastrointestinálneho traktu, čo zasa ovplyvňuje eubiózu. V tomto vzťahu je zachovaná štruktúrna a funkčná integrita sliznice; motorická aktivita, zabezpečujúca pohyb substrátu pozdĺž gastrointestinálneho traktu; transformácia potravinových polymérov lipolýzou a hydrolýzou; transport živín cez vrstvu slizníc; regulácia tráviaceho procesu pomocou substrátových a neuroendokrinných mechanizmov; ochrana tela pred agresiou cudzích antigénov; udržiavanie eubiózy a udržiavanie kvalitatívnych a kvantitatívnych konštánt populačnej bilancie črevnej mikrobiocenózy [8].

Jedným z ochorení, ktoré, ako dokazujú početné štúdie v posledných rokoch, sprevádzajú zmeny v mikrobiocenóze GIT, je syndróm dráždivého čreva (IBS). Podľa Rímskeho konsenzu III o funkčných poruchách trávenia, IBS je funkčné črevné ochorenie, pri ktorom je brušná bolesť alebo abdominálne nepohodlie spojené s defekáciou, zmenami vo frekvencii a povahe stolice. V závislosti od symptómov je IBS rozdelená do troch foriem: s prevahou hnačky, s prevahou zápchy a zmiešanou, ktorá je charakterizovaná striedaním zápchy a hnačky [9]. Schopnosť črevnej mikroflóry produkovať neurotransmitery, ktoré ovplyvňujú enterický systém, a tým menia sekréciu a motilitu čreva, ako aj prah citlivosti na viscerálny systém, poukazuje na význam dysbiotických zmien v patogenéze CPK [10, 11].

Je známe, že zloženie mikroflóry výkalov sa líši od zloženia črevnej sliznice. Aká je však povaha týchto rozdielov a či klinická forma ochorenia nie je známa. Vzhľadom na vyššie uvedené sa nám zdalo dôležité a zaujímavé študovať zloženie parietálnej mikroflóry konečníka zdravých jedincov a pacientov s IBS; vykonať komparatívne hodnotenie zloženia mikroflóry dutiny a parietálneho rektálneho mikrobiotopu pacientov s IBS s použitím polymerázovej reťazovej reakcie v reálnom čase (PCR-RV).

Materiál a metódy

Na vyriešenie problémov bolo vybraných 40 pacientov s IBS: 20 pacientov bolo diagnostikovaných s IBS s prevahou hnačky (IBS-D) a 20 pacientov s IBS s prevalenciou zápchy (IBS-W). Diagnóza ochorenia bola založená na diagnostických kritériách vyvinutých Rímskym konsenzom III o funkčných poruchách trávenia. Muži predstavovali 62,5%, priemerný vek pacientov bol 39,6 ± 8,0 rokov. Kontrolnú skupinu (GC) tvorilo 14 zdravých dobrovoľníkov zdravej výživy vo veku od 19 do 50 rokov (11 mužov a 3 ženy). Povinnou podmienkou zaradenia do skupiny subjektov bol písomný písomný súhlas každého pacienta a zdravého subjektu. Vzorky bioptických vzoriek rektálnej sliznice sa odobrali od zdravých jedincov a vybraných pacientov počas fibrosigmoskopie, od pacientov sa odobrali vzorky výkalov, ktoré sa zmrazili na následnú molekulovú analýzu pomocou PCR-RV.

PCR diagnostika skúmaných vzoriek sa uskutočnila s použitím zosilňovača DT96 (NPO DNA-Tekhnologiya, Rusko), ktorý zabezpečil výkon PCR s automatickým zaznamenávaním výsledkov v režime „reálneho času“. Reagenčná súprava obsahovala zmes na PCR amplifikáciu, špecifickú pre všetky baktérie (celková hmotnosť baktérií), špecifické zmesi pre mikroorganizmy, ktoré sa majú detegovať. Interná kontrolná vzorka bola pridaná do jednej z skúmaviek s amplifikačnou zmesou na vyhodnotenie účinnosti PCR behu. Jedna z skúmaviek obsahovala zmes na amplifikáciu ľudskej genómovej DNA, určenú na vyhodnotenie kontroly užívania klinického materiálu.

V skúmaných vzorkách boli metódou PCR-RV určené nasledujúce indikátory: kontrola zberu materiálu (CME), celková hmotnosť baktérií (MBP), absolútne hodnoty mikroorganizmov, s následným výpočtom relatívnych ukazovateľov. Absolútne hodnoty MBP, CME a diagnostikovaných mikroorganizmov vo výsledkoch PCR-RV boli prezentované ako logaritmické desatinné číslo (lg) vypočítané z počtu prahových cyklov a zhruba zodpovedajú množstvu požadovanej DNA exprimovanej v ekvivalentnom genóme vo vzorke (GE / obr). Pre objektívnejšiu analýzu boli vypočítané relatívne kvantitatívne ukazovatele mikrobiódy, ktoré odrážajú počet špecifických mikroorganizmov vo vzťahu k celkovej hmotnosti baktérií. Relatívne ukazovatele boli prezentované ako rozdiel dekadických logaritmov zodpovedajúcej skupiny mikroorganizmov a celkovej hmotnosti baktérií.

Vo vzorkách bolo identifikovaných 27 skupín baktérií štyroch hlavných fylotypov (Firmicutes, Bacteroidetes, Proteobacteria, Actinobacteria) (tabuľka 1).

Štatistické spracovanie údajov sa vykonávalo na osobnom počítači pomocou licencovaných počítačových programov Microsoft Excel 2007 a SPSS-Statistics 17. Pri analýze distribúcie kvantitatívnych údajov sa určujú centrálne trendové opatrenia - medián (Me) - a rozptylové opatrenia - interquartilný rozsah vo forme 25 a 75% percentilov. Na výpočet spoľahlivosti rozdielov v malých vzorkách sa použil neparametrický Mann-Whitneyov test. Kritériom štatistickej významnosti bola hladina p ≤ 0,05.

Výsledky výskumu a diskusia

V prvej fáze práce bola vykonaná komparatívna analýza mikroflóry rektálnej sliznice zdravých dobrovoľníkov a pacientov s IBS-D a IBS-W. V prvom rade je pozoruhodné zvýšenie celkovej bakteriálnej kontaminácie rektálnej sliznice v oboch klinických formách IBS. Rozdiely v CPK-3 - MBP - 6,0 (5,6; 6,5) gg / arr boli štatisticky významné. v porovnaní s kontrolnou skupinou MBP - 5.2 (4.0; 5.6) log GE / arr. (p = 0,002).

V IBS, bez ohľadu na klinickú formu, sa v slizničnej mikroflóre rekta v porovnaní s GK zistil zvýšený obsah Faecalibacterium praustnizi: v IBS-G (p = 0,047), IBS-D (p = 0,05). U pacientov s IBS-D bola koncentrácia Eubacterium spp. (p = 0,049) (Obr. 1).

Na stanovenie vzťahu medzi maximálnou frekvenciou stolice za deň s IBS-D a koncentráciou eubaktérií na rektálnej sliznici bola vykonaná korelačná analýza týchto ukazovateľov. Zistilo sa, že maximálny počet pohybov čriev za deň negatívne koreluje s koncentráciou eubaktérií v sliznici konečníka (-0,47; p